導(dǎo)語

流式細胞儀（Flow Cytometer）是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段，可以每秒鐘分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù)。其應(yīng)用范圍非常廣泛，而且還在不斷增加。當然，細胞分選也是它的重要應(yīng)用之一。它能夠根據(jù)每個細胞的光散射和熒光特征，將特定的細胞從細胞群體中分選出來。每次一個細胞。所以人們又常常將流式細胞儀稱為熒光激活細胞分選儀（fluorescence-activated cell sorter, FACS），其實FACS并不是流式細胞儀的通稱，它是BD公司的注冊商標。

細胞分選的原理

當經(jīng)熒光染色或標記的單細胞懸液放入樣品管中，被高壓壓入流動室內(nèi)。流動室內(nèi)充滿鞘液，在鞘液的包裹和推動下，細胞被排成單列，以一定速度從流動室噴口噴出。在流動室的噴口上配有一個超高頻的壓電晶體，充電后振動，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴，待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負不同的電荷，當液滴流經(jīng)過帶有幾千伏的偏轉(zhuǎn)板時，在高壓電場的作用下偏轉(zhuǎn)，落入各自的收集容器中，沒有充電的液滴落入中間的廢液容器，從而實現(xiàn)細胞的分離。

流式細胞分選的特點

1. 少量細胞分選時，流式細胞分選精確度高（99%以上），速度快。目前，先進的流式細胞儀的分選速度可達25 000個細胞/秒以上，比傳統(tǒng)的分選速度提高了很多倍，原來需要一天的工作現(xiàn)在只需要幾小時就能完成。不過流式細胞儀分離細胞的量還是有一定的限制，一次分離的最大合理量約為108個細胞。如果細胞量超過109個，則需要耗費10小時以上，分選后細胞的活力會受到很大的影響。

2. 可以同時進行多個Marker分選，正選負選同時進行。以前的流式細胞儀只能給液滴充上正電荷或負電荷，因此在電場中只能向左或向右偏轉(zhuǎn)，即兩路分選?，F(xiàn)在的儀器可以給液滴充以不同的電量，從而調(diào)整液滴的偏轉(zhuǎn)角度，實現(xiàn)多路分選。BD的FACSAria流式細胞儀就可以進行四路分選。

3. 不僅僅限于表面抗原，流式細胞儀可以根據(jù)任何能檢測到的發(fā)光度（如細胞體積）或熒光（如DNA、RNA或蛋白含量，酶活性，特異抗原）散射度差異來分離細胞。如果能保證流式細胞儀的無菌狀態(tài)，那么分選后的細胞還可以進行培養(yǎng)或其他分析。

4. 如果只是偶爾做幾次細胞分選的話，用流式分選還是比較劃算的，只需要準備樣品和抗體，交納一定的儀器使用費即可，不需要購買配套的設(shè)備。